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能耐受PCR热循环的Beadstar-mPlex®磁性荧光编码微球

  • 发布日期:2023-06-27      浏览次数:781
    • 流式荧光法不仅能高通量检测抗原,还能高通量检测核酸。 比如说常见的项目HPV分型,就非常合适用流式荧光法检测。然而如果仅仅只靠核酸杂交来获得信号,很难达到理想的灵敏度(虽然是悬浮芯片,但也是固液相反应效率肯定不如液液反应效率)。因此悬浮芯片会采用先扩增,再杂交的方法来放大信号,提高检测的灵敏度。为什么不在球上直接做扩增反应了。这涉及到了荧光编码微球是否耐热的问题。为了考察碧芯生物Beadstar-mPlex®磁性荧光编码微球是否耐热,我们做了一下研究工作。

      碧芯生物的Beadstar-mPlex®磁性荧光编码微球能不能做杂交?

      可以,在95度 3分钟,48度1小时的杂交条件下,能获得较好的荧光信号(条件还在优化中,欢迎咨询)

       

      能不能直接再球上扩增,碧芯生物做了两个尝试?

      1 等温扩增。在球上直接进行滚环扩增(RCA, 文章已发表,doi.org/10.1016/j.cclet.2023.108141)和重组酶介导链替换核酸扩增技术(RAA,文章在投)

       

      2 PCR反应。目前市面上多数的荧光编码微球都难以耐受PCR的热循环,因此很少见到有直接在磁性荧光编码微球上进行PCR再流式高通量分析核酸分子的产品。为了填补这一块的空白,碧芯生物科技从我们在售的6微米羧基修饰的磁性荧光编码微球中筛选出由23种耐95度的磁性荧光编码微球的阵列,供需要在微球表面进行PCR反应的用户选择。图1为23群微球的阵列)


                                                                                        图1:左图为23群磁性荧光编码微球未PCR的流式图;右图为23群微球经过一个PCR流程后的流式图

               综上所述, 碧芯生物Beadstar-mPlex®磁性荧光编码微球有着的热稳定性,不管您是PCR完了做杂交,还是直接在球上PCR, 碧芯生物Beadstar-mPlex®磁性荧光编码微球都可以帮您建立稳定的检测体系。

       PCR热循环程序:

      温度(℃)

      时间(s)

      循环数(Cycle)

      94

      180

      1

      94

      30

       

      31

      58

      30

      72

      30

      72

      300

      1

      4

      holding

      1