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Luminex公司每群圈出的微球区域荧光分布较窄,即使在两个荧光通道的批间荧光CV高于5%都会出现较严重的偏离,在当前Luminex如此苛刻的设置下,其它厂家制备能在Luminex仪器上使用的磁性荧光编码微球的难度甚至比Luminex公司自身生产微球还高。
基于我们在荧光编码中积累的成熟技术,我们可以随意调控微球在“Classification1"和“Classification2"荧光通道内的荧光强度,因此具备了研发能在L家仪器上直接使用的微球的能力。如图1所示,我们制备的24群微球能很好的落在L家的“圈圈"内。到目前为止,我们已经制备出40种能在Luminex200上使用的微球,后续我们将持续开发更多的能在L家仪器上使用的磁性荧光编码微球。
图1 可在Luminex200上的清晰区分的磁性荧光编码微球
此外,我们也在分群差错率方面,评估了这些微球是否能真正清晰区分,我们随机选择了12种微球,对应Luminex200的编码为:12,18,25,26,35,51,54,61,66,67,72,78。并对单群微球逐一上机(Luminex200),统计各个编码微球数量,得到如下报告:
图2 12群微球上机得到的报告图
从结果中可以看出,多个编码的微球分群差错率为0,整体微球分群差错率不高于2%,这里面还包括了批量进样时清洗不干净导致的错判,因此实际的分群差错率更低。此外,由于报告荧光值一般采用中位数荧光值,这么低的错判率不会影响最终结果的准确性。
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